本试剂盒运用酶联免疫吸附双抗体夹心技术原理，在微孔板表面固定人促睡眠肽特异性捕获抗体，待测样本、标准品中的DSIP抗原可特异性结合固相抗体，孵育结合后洗去未结合物质，加入酶检测抗体形成夹心免疫复合物，底物在酶的催化下产生有色产物，终止反应后测定吸光度，通过标准曲线换算得出样本中人促睡眠肽的浓度。
基本参数：
产品名称：人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒
英文名称：DSIP Elisa Kit
货号：Y-E195
规格：48T/96T
灵敏度：最低可测 3.5ng/L
检测范围：8ng/L - 320ng/L
反应时间：包被孔样本孵育 75min，酶结合物 40min，显色 12min，总时长 127min
显色系统：可溶性 TMB 底物显色体系
检测波长：450nm，参考 620nm
特异性：不与褪黑素、5 - 羟色胺发生交叉结合，同源肽交叉率＜3%
重复性：板内 CV≤7.0%，板间 CV≤8.5%
注意事项：全程避光操作显色步骤，废液按生物危害废弃物处理，剩余试剂 2-8℃避光保存
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒所有组分室温放置 35min，配置洗涤工作液与标准品稀释液，裁剪适配数量包被板条。
标准品孔添加不同浓度 DSIP 标准品 50μL，待测样本按照说明书比例稀释后上样 50μL，空白对照孔加入缓冲稀释液。
直接向全部微孔加入酶标记二抗工作液 100μL，密封封板，低速震荡混匀 20 秒。
37℃孵育箱密闭孵育 70min，杜绝环境光线干扰结合反应。
弃去孔中反应液，洗板机自动洗板 6 次，每次浸泡 35s，最后一次彻底拍干微孔内水分。
每孔依次加入显色液 A、显色液 B 各 50μL，避光混匀，室温避光显色 20min。
滴加终止液终止酶促显色，酶标仪 450nm 检测 OD 值，绘制标准曲线计算样本促睡眠肽浓度。
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