本试剂盒采用特异性双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔包被人促胃液素受体特异性抗体,样本中含有的GsaR抗原与包被抗体特异性结合,洗涤去除非特异性结合物后,加入酶标记配对抗体形成稳定的免疫夹心复合物,经底物显色、终止反应后,利用酶标仪检测吸光度,结合标准曲线定量分析样本中人促胃液素受体的表达含量。
基本参数:

产品名称:人促胃液素受体(GsaR)ELISA试剂盒
英文名称:GsaR Elisa Kit
货号:Y-E369
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.08ng/mL
检测范围:0.2ng/mL - 8ng/mL
反应时间:样本孵育 80min,二抗 50min,底物显色 18min,合计 148min
显色系统:HRP 标记 TMB 显色,酸性终止液终止
检测波长:450nm
特异性:特异性靶向促胃液素受体,与胃动素受体无交叉识别
重复性:板内 CV<7.2%,板间 CV<8.8%
注意事项:组织匀浆样本需离心去除沉淀,避免杂质干扰显色;开封后板条密封防潮保存
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 28min,配制 1× 洗涤缓冲液,取出酶标板并划分标品孔、样本孔、空白孔组别。
梯度稀释 GsaR 标准品并每孔加液 50μL;组织裂解 / 血清待测样本稀释后加入样本孔 50μL;空白孔补稀释液。
各孔加入酶偶联抗体工作液 100μL,封板膜严实封口,前后轻摇酶标板混匀。
37℃恒温避光孵育 55min,放置过程中避免挪动酶标板。
手动洗板 5 轮,每轮洗涤液浸润微孔 30s,倒扣沥干液体,吸水纸按压板底除水。
避光添加显色 A 液、B 液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 18min。
加入终止液 50μL 终止反应,450nm 波长测吸光值,依托标准曲线计算样本 GsaR 表达量。
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