本试剂盒采用间接ELISA技术特异性检测人样本中β2糖蛋白1抗体IgG,酶标板微孔固相包被高纯度人β2-GP1抗原,加入待测样本后,样本中的β2-GP1 IgG抗体与抗原特异性结合,经洗涤去除未结合物质,加入辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体,特异性结合样本抗体,启动底物显色反应,吸光度值与β2-GP1 Ab IgG含量成正比,据此定量检测样本中目标抗体浓度。
产品参数:
产品名称 | 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E532 |
英文名称 | β2-GP1 Ab IgG Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
1.灵敏度:最低阳性阈值 8AU/mL
2.检测范围:10~500AU/mL
3.反应时间:样本温育 70min,抗人 IgG 酶标二抗 40min,显色 16min
4.显色系统:HRP-TMB 显色
5.检测波长:450nm,校正 630nm
6.特异性:特异性结合 β2-GP1-IgG,与 IgA、IgM 无交叉识别
7.重复性:批内 CV<5%,批间 CV<7%
8.注意事项:试剂盒开封后 1 个月内用完;终止后 5min 内完成读板
实验前准备工作:
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
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实验操作流程:
试剂室温平衡 30min,标准品用稀释液溶解并梯度配比,待测血清样本按说明书稀释处理,酶标板分区标注孔位类型。
向对应微孔添加标准品工作液、稀释后待测样本,空白孔仅加样本稀释液,加样避免触碰微孔底部包被膜。
直接加入酶标记抗人 IgG 抗体工作液,封板膜密封,37℃避光孵育 58min,一步法完成免疫结合。
弃去孔中液体,加满洗涤液浸泡 30s 后甩干,循环洗板 5 次,吸水纸拍干微孔残留液体。
避光加入显色 A、B 液,轻晃酶标板混匀,室温避光显色 15min。
加入终止液终止显色反应,混匀板条内所有微孔反应体系。
酶标仪读取 450nm 吸光度,绘制标准曲线,计算样本 β2-GP1 Ab IgG 含量。
关键字: 人β2糖蛋白1抗体IgG;β2-GP1 Ab IgG;ELISA试剂盒;
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