本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术检测人β连环蛋白含量,酶标板微孔固定抗β-Cat特异性抗体,加入标准品及待测样本后,样本中的β-Cat抗原被固相抗体特异性捕获,洗涤去除非特异性结合物质,加入酶标记检测抗体构建夹心免疫复合物,催化底物显色,吸光度值与样本中β-Cat浓度呈线性相关,据此完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3531 |
英文名称 | β-Cat ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
1.灵敏度:检出限 0.1ng/mL
2.检测范围:0.312~20ng/mL
3.反应时间:样本温育 90min,二抗孵育 60min,避光显色 19min
4.显色系统:双组份 TMB 底物液
5.检测波长:450nm,参比 570nm
6.特异性:靶向人 β 连环蛋白,α、γ 连环蛋白交叉反应可忽略
7.重复性:板内 CV≤6.7%,板间 CV≤8.7%
8.注意事项:组织裂解液需充分离心去除沉淀杂质
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂室温放置 36min,标准品梯度稀释,细胞裂解液待测样本预处理去除杂质,酶标板分区标记各类孔位。
向微孔精准加样,标准孔、样本孔依次添加对应液体,空白孔加稀释缓冲液,避免产生气泡。
直接加入酶标二抗工作液,封板密封,37℃避光孵育 70min,一步完成夹心 ELISA 结合。
弃液后洗板,洗涤液浸泡微孔 40s 甩干,循环洗板 6 次,彻底洗脱未结合蛋白。
避光添加显色底物 A、B 液,混匀后避光显色 17min。
加入终止液终止反应,摇晃酶标板混匀各孔。
酶标仪 450nm 测 OD 值,依据标准曲线计算 β-Cat 含量。
关键字: 人β连环蛋白/联蛋白;β-Cat;ELISA试剂盒;
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