人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争ELISA法检测人样本中β内酰胺酶抑制剂含量，酶标板包被固定BLI抗原，待测样本中的BLI与固相抗原竞争结合体系中的特异性酶标抗体，样本中BLI浓度越高，固相结合的酶标抗体量越少，底物显色反应越弱，通过检测吸光度值并对照竞争标准曲线，即可定量测定样本中BLI的含量。
产品参数：

‌1.灵敏度：检出限 0.04μg/mL

2.检测范围：0.125~8μg/mL

3.反应时间：竞争模式孵育 95min，显色 24min

4.显色系统：竞争法专用 TMB 显色体系

5.检测波长：450nm

6.特异性：针对临床常用 β 内酰胺酶抑制剂特异性结合，无杂蛋白干扰

7.重复性：板内 CV≤7.5%，板间 CV≤9.5%

8.注意事项：药物稀释液需使用试剂盒配套缓冲液，不可自行配制
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂室温回温 34min，标准品梯度稀释配制，待测药液 / 生物样本过滤预处理，排版标记酶标板孔位类型。

精准向微孔加入标准工作液、待测样本，空白孔加入等量稀释液，一孔更换一次枪头。

直接添加酶标记抗体工作液，封板避光 37℃孵育 74min，一步法夹心 ELISA 反应。

揭膜弃液，洗板液浸泡 40s 甩干，重复洗板 5 次，倒扣拍干板条残留洗液。

避光加入显色底物 A、B 液，混匀显色 19min。

加入终止液终止显色，摇晃酶标板使体系混匀。

450nm 酶标仪测 OD 值，拟合标准曲线计算 BLI 浓度。