本试剂盒采用间接ELISA检测原理，酶标板预先包被大疱性类天疱疮抗原，待测样本中的人大疱性类天疱疮抗体可与固相抗原特异性结合，洗去未结合杂质后，加入酶标记抗人IgG抗体，形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，催化底物显色，终止反应后测定吸光度，吸光度数值与样本中BP抗体含量正相关，通过标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒
英文名称：BP Elisa Kit
货号：Y-E572
规格：48T/96T
灵敏度：阳性临界值 12AU/mL
检测范围：15AU/mL - 600AU/mL
反应时间：样本孵育 82min，二抗 48min，显色 18min，合计 148min
显色系统：稳定 TMB 显色体系
检测波长：450nm
特异性：特异性结合 BP180/BP230 抗原表位，与天疱疮抗体无交叉
重复性：板内 CV＜7.6%，板间 CV＜8.9%
注意事项：血清样本不可高温灭活，试剂盒避免强光直射，所有耗材一次性使用
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温复温 31min，配制洗涤工作液，拆分酶标板，剩余板条密封 2~8℃保存。
BP 阳性对照标准品梯度稀释后每孔加 50μL，患者血清样本稀释后加样 50μL，空白孔补稀释缓冲液。
全部微孔加入酶标记二抗工作液 100μL，覆膜封板，前后晃动酶标板混匀液体。
37℃恒温孵育 54min，全程避光防止酶标记物活性下降。
洗板操作 4 轮，每轮加满洗涤液浸泡 42s，甩干后充分拍干微孔。
避光添加显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 14min。
加入终止液终止反应，10min 内 450nm 测吸光度，判定并计算 BP 抗体滴度与浓度。
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