本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板固相包被人单核细胞增多性李斯特菌素O特异性抗体，样本中的LLO抗原与包被抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记二抗形成免疫夹心复合物，酶催化底物显色，终止反应后检测吸光度，依据标准曲线精准定量样本中LLO的含量。
基本参数：
产品名称：人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA试剂盒
英文名称：LLO Elisa Kit
货号：Y-E556
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出 0.05ng/mL
检测范围：0.12ng/mL - 4.8ng/mL
反应时间：捕获孵育 95min，二抗 55min，显色 24min，总 174min
显色系统：即用型 TMB 显色试剂
检测波长：450nm
特异性：特异性结合李斯特菌 LLO 溶血素，与其他细菌溶血素无交叉
重复性：板内 CV＜8.5%，板间 CV＜10.0%
注意事项：活菌样本需灭活处理后再检测，操作全程生物安全二级防护
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
整套试剂盒室温放置 44min，稀释浓缩洗涤缓冲液，按需取用包被酶标板条，密封剩余试剂。
LLO 梯度标准品每孔加 50μL，细菌培养上清样本稀释后上样 50μL，空白对照孔添加稀释缓冲液。
所有孔位加入酶偶联检测工作液 100μL，封板封口，震荡混匀 30s。
37℃密闭避光孵育 78min，保证抗原抗体充分夹心结合。
手动洗板 6 次，单次浸泡 29s，彻底弃除孔内废液并拍干板条。
避光依次加入显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 24min。
终止液终止酶促反应，16min 内 450nm 测定 OD 值，计算李斯特菌素 LLO 浓度。
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