本试剂盒运用经典双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，将人蛋白C特异性单克隆抗体固定于微孔板固相载体，加入待测样本后，样本内的人蛋白C抗原与固相抗体发生特异性免疫结合，孵育洗板去除未结合物质，再加入对应的酶标二抗形成夹心复合物，随后加入显色底物启动酶促显色反应，显色深浅与样本中人蛋白C含量正相关，通过酶标仪检测吸光度并对照标准曲线，即可完成样本中人蛋白C的定量分析。
基本参数：
产品名称：人蛋白C(Protein C)ELISA试剂盒
英文名称：Protein C ELISA Kit
货号：Y-E2786
规格：48T/96T
灵敏度：≤0.2μg/mL
检测范围：0.5μg/mL - 32μg/mL
反应时间：总时长 95min（样本 50min，二抗 25min，显色 20min）
显色系统：HRP 介导 TMB 显色体系
检测波长：450nm，参考波长 570nm
特异性：针对血浆游离型蛋白 C，与凝血因子无交叉识别
重复性：板内 CV＜7.0%，板间 CV＜8.5%
注意事项：抗凝样本优先选用枸橼酸钠抗凝，肝素抗凝会干扰结果
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂常温放置 30min，稀释浓缩洗液，配制蛋白 C 标准品梯度浓度，酶标板分区标注空白对照、标准梯度、待测样本孔。
对应孔位分别添加标准品溶液、待测稀释样本、空白稀释液，每孔加入预混酶标抗体工作液，封板膜密封板条。
37℃恒温培养箱避光孵育 70min，让样本中蛋白 C 与包被抗体、酶标抗体夹心结合。
弃去孔中反应液，洗涤液加满每孔静置 35s 后倒扣拍干，连续洗板 5 次，彻底洗除非特异性吸附物质。
依次加入显色液 A 与显色液 B，板板混匀后 37℃避光显色 20min。
滴加终止液终止显色反应，充分混匀板内液体。
酶标仪 450nm 测 OD 值，依托标准曲线方程计算样本蛋白 C 具体含量。
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