本试剂盒基于抗原抗体特异性结合的双抗体夹心ELISA原理,固相微孔板包被有人蛋白Z特异性抗体,加入待测样本与标准品后,样本中的人蛋白Z与固相抗体特异性结合,经洗涤去除未结合成分,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体与之结合,形成完整免疫复合物,加入显色底物后发生酶促显色反应,终止显色后测定吸光度,吸光度数值与样本中人蛋白Z浓度呈正相关,进而实现定量检测。
基本参数:

产品名称:人蛋白Z(Protein Z)ELISA试剂盒
英文名称:Protein Z ELISA Kit
货号:Y-E2622
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.12ng/μL
检测范围:0.25ng/μL - 16ng/μL
反应时间:总时长 105min(样本孵育 55min,二抗 30min,显色 20min)
显色系统:TMB 显色液,硫酸终止液终止
检测波长:450nm,辅波长 620nm
特异性:仅特异性识别人源蛋白 Z,无凝血蛋白交叉反应
重复性:板内 CV<6.8%,板间 CV<8.2%
注意事项:终止液为强酸,操作佩戴手套,废液单独收集处理
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

所有试剂室温放置 32min,稀释浓缩洗涤液,逐级稀释蛋白 Z 标准品,酶标板拆分所需板条并标记孔类型。
各孔分别加入标准品、待测样本、空白稀释液,每孔添加酶标记抗体工作液,覆膜封闭酶标板。
37℃孵育箱避光孵育 65min,实现抗原双抗体夹心结合。
倒掉孔内液体,洗涤液浸泡每孔 30s,甩干,反复洗板 4 次,在吸水纸上拍干残留洗液。
加入 TMB 显色液,混匀后 37℃避光显色 16min。
加入终止液终止酶促反应,轻柔摇晃酶标板混匀。
酶标仪检测 450nm 吸光值,根据标准曲线定量样本蛋白 Z 含量。
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