本试剂盒运用间接法酶联免疫吸附检测原理，微孔板预先包被纯化的登革热病毒特异性抗原，加入待测人体样本后，样本中的登革热抗体可与固相抗原特异性结合，孵育洗涤去除游离杂质，加入酶标记抗人免疫球蛋白二抗，结合目标抗体后启动底物显色反应，显色强度与样本中登革热抗体含量正相关，通过吸光度检测实现抗体的定性与定量分析。
基本参数：
产品名称：人登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒
英文名称：DF Elisa Kit
货号：Y-E605
规格：48T/96T
灵敏度：阴性对照临界 OD 值≤0.15
检测范围：血清 1:50~1:3200 稀释定性半定量
反应时间：总时长 138min（样本 78min，二抗 40min，显色 20min）
显色系统：间接法 HRP-TMB 显色
检测波长：450nm
特异性：覆盖登革热 1-4 型抗体，与寨卡、乙脑病毒抗体无交叉
重复性：板内 CV＜5.9%，板间 CV＜7.4%
注意事项：阳性样本需结合临床复核，仅作为初筛辅助检测手段
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 31min，稀释洗涤工作液，设置阳性对照梯度标准品，标记酶标板空白、对照、样本孔。
标准 / 对照孔、待测样本孔、空白孔加入对应体系，添加酶标记二抗工作液，覆膜封板。
37℃避光孵育 69min，抗原与样本抗体一步结合。
弃去孔内液体，洗涤液浸泡 34s，洗板 5 次，彻底拍干残留洗液。
加入显色液 A、B 混匀，37℃避光显色 19min。
滴加终止液终止显色，水平摇晃酶标板混匀。
450nm 测 OD 值，对照标准曲线判读登革热抗体阳性与浓度。
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