本试剂盒基于间接ELISA检测原理，将纯化的BB抗原固定包被于酶标板微孔中，封闭空白位点后加入待测样本，样本中的人抗BB抗体可与固相BB抗原发生特异性结合，洗板去除未结合物质，加入酶标记抗人免疫球蛋白二抗并孵育结合，经底物显色、终止显色步骤后，检测样本孔吸光度，结合标准曲线定量检测人抗BB抗体的浓度。
基本参数：
产品名称：人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒
英文名称：BB-Ab Elisa Kit
货号：Y-E458
规格：48T/96T
灵敏度：临界 OD 值 0.15，最低可检出弱阳性样本
检测范围：定性阴阳性判定，定量区间 0.3–15RU/mL
反应时间：样本孵育 80min，酶结合物 55min，显色 16min，总 151min
保存条件：试剂盒 2–8℃避光储存，拆分板条装入自封袋加干燥剂冷藏
显色系统：HRP-TMB 显色体系
检测波长：450nm
标准曲线绘制：采用定值参考品做标准曲线，RU 值与 OD 值线性拟合判读结果
注意事项：避免实验环境温度高于 28℃；空白孔必须设置；试剂盒过期严禁使用
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
血清样本制备
静脉血分离血清，无浑浊无溶血，样本若粘稠可 10000r/min 离心 10min 取上清，分装冻存避免反复冻融 3 次以上。
试剂整体复温
全套试剂盒室温放置 30min，浓缩洗涤液纯水稀释配比完成，搅拌均匀备用。
标准品梯度配制
BB 抗体标准品用配套稀释液溶解，倍比稀释 6 个梯度浓度，每孔加对应标准品 50μL，设立空白对照孔。
一步法加样孵育
待测样本 50μL 入孔，加入酶标记抗原工作液 50μL，封板封口，37℃恒温孵育 60min。
微孔洗涤程序
弃净孔内液体，洗涤液注满微孔浸泡 30s，拍干，循环洗板 5 次，每次拍干力度均匀。
底物显色孵育
每孔加入显色底物液 100μL，避光 37℃显色 13min，观察颜色变化统一终止。
终止读数判读
加入终止液 50μL 终止反应，酶标仪 450nm 读取吸光值，对照标准曲线计算抗 BB 抗体含量。
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