本试剂盒采用竞争法ELISA检测原理,适配低分子肝素小分子抗原检测特性,微孔板固相包被低分子肝素特异性抗原,待测样本中的LMWH与固相抗原竞争结合体系中的限量特异性抗体,孵育反应后洗涤去除未结合组分,加入酶标二抗与结合态抗体结合,底物显色后,样本中低分子肝素浓度越高,显色信号越弱,吸光度值与目标物浓度呈负相关,以此完成精准定量检测。
基本参数:

产品名称:人低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒
英文名称:LMWH ELISA Kit
货号:Y-E2809
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.01IU/mL
检测范围:0.02IU/mL - 1.28IU/mL
反应时间:总时长 112min(样本 62min,二抗 30min,显色 20min)
显色系统:竞争抑制法 TMB 显色
检测波长:450nm
特异性:区分普通肝素与低分子肝素,不结合体内肝素结合蛋白
重复性:板内 CV<6.5%,板间 CV<8.0%
注意事项:抗凝血浆样本不可使用肝素类抗凝剂,会直接干扰定量
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂室温平衡 28min,稀释浓缩洗涤液,配制低分子肝素梯度标准溶液,酶标板做好孔位分类标记。
标准孔、样本孔、空白孔分别加入对应液体,每孔加入一步法酶偶联工作液,密封封板。
37℃避光孵育 59min,固相免疫一步结合反应。
去除封板倾倒废液,洗涤液浸泡 30s,洗板 4 次后拍干板条。
加入 TMB 显色液,轻微震荡混匀,37℃避光显色 13min。
加入终止液终止显色反应,充分混匀。
酶标仪 450nm 检测吸光度,标准曲线法定量 LMWH 含量。
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