人补体因子D(CFD)ELISA试剂盒

本试剂盒以双抗体夹心ELISA技术为核心检测原理，将人CFD特异性抗体固定于微孔板固相载体，加入待测样本后，样本内的人补体因子D可与固相抗体特异性结合，孵育反应后洗涤去除未结合杂质，加入酶标检测抗体形成夹心免疫复合物，再次洗涤后加入显色底物，酶催化底物显色，颜色深浅对应样本中CFD的含量高低，通过酶标仪读数及标准曲线拟合，实现样本中靶标因子的定量分析。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.02ng/mL

检测范围：0.08ng/mL–5.12ng/mL

反应时间：85min，样本孵育 45min，二抗 30min，显色 10min

显色系统：改良 TMB 底物显色液

检测波长：450nm

特异性：仅结合人 CFD，与因子 B、因子 H 交叉反应低于 1%

重复性：板内 CV 4.9%~6.1%，板间 CV 6.8%~7.9%

注意事项：终止后务必 15min 内完成酶标仪读数；试剂盒 2~8℃避光保存，严禁冷冻。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

所有试剂常温平衡 30min，按照说明书配比稀释 CFD 标准品，做好酶标板孔位分区标记区分对照与待测样本。

精准移液添加梯度 CFD 标准品、待测人体体液样本、稀释空白液至对应微孔内，加样避免产生气泡。

直接加入酶偶联检测抗体工作液，封板膜封闭酶标板，37℃避光孵育 65min 完成一步夹心免疫反应。

去除封板倒掉孔中液体，洗板液充分洗涤每孔，每次浸泡 35s，连续洗板 5 次后倒扣拍干。

每孔加入显色底物液，遮光条件下室温显色 14min，观察梯度显色层次。

加入终止液终止显色，轻敲酶标板混匀液体，终止后 10min 内完成读数。

酶标仪读取 450nmOD 值，建立标准曲线计算样本 CFD 浓度，整理实验台账。