本试剂盒采用固相酶联免疫吸附检测原理,微孔板预先包被人发动蛋白2(DNM2)特异性捕获抗体,样本中的DNM2抗原与固相抗体特异性结合后,结合酶标记DNM2检测抗体形成夹心免疫复合物,去除未结合多余成分后,酶催化底物发生显色反应,显色强度与样本中DNM2含量正相关,据此可精准定量人DNM2的浓度。
基本参数:

产品名称:人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒
英文名称:DNM2 ELISA Kit
货号:Y-E3517
规格:48T/96T
灵敏度:检测下限 0.1ng/mL
检测范围:0.4ng/mL - 32ng/mL
反应时间:包被板封闭 25min,样本孵育 80min,二抗 50min,显色 22min
显色系统:单组份稳定型 TMB 显色试剂
检测波长:450nm
特异性:仅识别 DNM2 亚型,DNM1/3 同源蛋白交叉反应<3.0%
重复性:板内 CV≤6.3%,板间 CV≤8.9%
注意事项:细胞裂解液需去除核酸杂质;终止后尽快读数,吸光值会随时间缓慢衰减
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒组分室温回温 28min,用配套稀释液逐级稀释 DNM2 标准品,标记 96 孔板空白、标准、待测样本孔及复孔位置。
每孔加入待检液 / 标准品 / 空白液 50μL,立刻加入一步法酶联工作液 100μL,封板膜密封。
37℃恒温避光孵育 65min,全程避光防止酶试剂失活。
掀开封板倒掉废液,洗涤液加满每孔,浸泡 30s 后拍干,连续洗板 4 次。
每孔依次加入显色 A、B 液各 50μL,板体轻摇混匀,37℃避光显色 16min。
加入终止液 50μL / 孔,水平晃动酶标板使终止液混匀,终止显色。
酶标仪 450nm 检测 OD 值,通过标准曲线计算 DNM2 样本浓度,整理实验台账。
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