本试剂盒基于特异性抗原抗体结合及酶促显色原理,固相微孔板包被人芳基硫酸酯酶A(ASA)特异性捕获抗体,样本中的ASA抗原与固相抗体精准结合后,结合酶标记检测抗体形成夹心复合物,经洗涤、显色、终止步骤后,通过酶标仪检测吸光度,定量测定样本中人ASA的表达含量。
基本参数:

产品名称:人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA试剂盒
英文名称:ASA Elisa Kit
货号:Y-E3004
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.04ng/mL
检测范围:0.1ng/mL - 15ng/mL
反应时间:一抗 75min,酶标二抗 44min,显色 15min
显色系统:OPD 显色底物体系
检测波长:490nm
特异性:专一识别 ASA,同家族芳基硫酸酯酶 B 交叉反应<2.0%
重复性:批内 CV≤5.2%,批间 CV≤7.5%
注意事项:样本 pH 值需控制在 7.0-7.5,过酸过碱会影响酶蛋白抗原性
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂室温平衡 30min,纯水稀释浓缩洗涤液,梯度稀释 ASA 标准品,在酶标板标注各组检测孔。
空白、标准品、样本孔分别加入对应液体 50μL,立刻加入一步法酶标记液 100μL,封板封口。
37℃避光孵育 48min,酶标板水平放置无倾斜。
倾倒废液,洗涤液注满孔内浸泡 30s,拍干,洗板 4 次。
加入 TMB 显色液 100μL / 孔,室温避光显色 16min。
加入终止液 50μL 混匀终止显色。
酶标仪 450nm 测吸光度,依据标准曲线计算 ASA 浓度。
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