本试剂盒基于抗原抗体特异性结合及酶促显色放大原理,微孔板预先固定人肺耐药蛋白(LRP)特异性捕获抗体,待测样本中的LRP抗原与固相抗体结合后,匹配的酶标检测抗体与之形成夹心复合物,去除未结合成分后底物显色,显色深浅对应LRP浓度,可定量检测样本中人LRP的水平。
基本参数:

产品名称:人肺耐药蛋白(LRP)ELISA试剂盒
英文名称:LRP Elisa Kit
货号:Y-E336
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.11ng/mL
检测范围:0.4ng/mL - 38ng/mL
反应时间:一抗 70min,二抗 40min,显色 19min
显色系统:TMB 显色液搭配 2mol/L 硫酸终止液
检测波长:450nm
特异性:区分 LRP 与 P-gp、MRP 耐药相关蛋白,无显著交叉反应
重复性:批内 CV≤6.2%,批间 CV≤8.7%
注意事项:肿瘤组织样本需充分裂解,未裂解完全会造成检测值假性偏低
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂常温回温 26min,配比稀释浓缩洗涤液,用稀释液制备 LRP 系列标准品,标注 96 孔板组别。
空白孔加稀释液,其余孔加入标准品或样本 50μL,马上加入一步法酶标记液 100μL,封板。
37℃避光孵育 59min,不可挪动反应板位置。
弃除废液,洗涤液浸泡每孔 36s,倒扣拍净,洗板 4 次。
加入 TMB 显色液 100μL / 孔,避光 37℃显色 17min。
加入终止液 50μL 混匀终止显色反应。
酶标仪 450nm 测吸光度,根据标准曲线定量 LRP 蛋白含量。
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