本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,微孔板固相包被人MRP特异性单克隆抗体,加入待测细胞、组织样本及标准品,样本中的MRP抗原与固相抗体特异性结合,洗涤纯化后加入酶标记二抗,构建免疫复合物并催化底物显色,吸光度数值与样本中MRP浓度呈正相关,通过标准曲线换算即可定量检测人MRP的表达水平。
基本参数:

产品名称:人多药耐药相关蛋白(MRP)ELISA试剂盒
英文名称:MRP ELISA Kit
货号:Y-E3523
规格:48T/96T
灵敏度:检测下限 0.04ng / 孔
检测范围:0.125ng/mL~8ng/mL
反应时间:37℃样本 80min,二抗 47min,显色 16min
显色系统:即用型 TMB 显色液
检测波长:450nm+600nm 双波长
特异性:主要识别 MRP1,与 P-gp、BCRP 无交叉识别
重复性:板内 CV<5.5%,板间 CV<9.5%
注意事项:肿瘤组织样本充分匀浆裂解,保证膜蛋白充分释放
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温放置 30min,稀释洗涤液,拆分酶标板,非实验用板条密封 2~8℃避光存放。
梯度标准品加入标准孔 50μL,细胞上清待测样本加入样本孔 50μL,空白孔空置。
全部反应孔添加酶标记工作液 100μL,混匀覆膜封板。
37℃孵育 56min,防尘静置反应。
倒掉孔内液体,洗板液浸泡 40s 拍干,循环洗板 5 次。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,混匀显色 13min。
终止液终止显色,450nm 测定 OD 值,定量 MRP 表达量。
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关键字: 人多药耐药相关蛋白;MRP;ELISA试剂盒;
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