本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先固定人聚集蛋白特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的Agrin抗原与固相抗体特异性结合；充分孵育并洗涤干净未结合物质后，加入酶标记聚集蛋白检测抗体，形成特异性免疫夹心复合物；后续经底物显色、终止反应、吸光度检测，显色深浅与样本中聚集蛋白含量成正比，依据标准曲线可精准定量样本中靶蛋白的含量。
基本参数：
产品名称：人聚集蛋白(Agrin)ELISA试剂盒
英文名称：Agrin ELISA Kit
货号：Y-E3505
规格：48T/96T
灵敏度：最小检出 0.3ng/mL
检测范围：0.6~38.4ng/mL
反应时间：样本孵育 78min，酶二抗 44min，显色 16min
保存条件：整套试剂 2~8℃，稀释洗涤液 4℃一周内用完
显色系统：A、B 液混合后显色反应
检测波长：450nm 为主波长读数
标准曲线绘制：直线线性拟合标准曲线，OD 值与蛋白浓度呈正比换算结果
注意事项：神经组织样本充分研磨匀浆；操作佩戴手套避免蛋白污染；底物液浑浊则废弃使用
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温放置 31min，取用所需固相酶标板，设定标准品孔、待测样本孔、空白孔，每孔上样稀释处理后样品 100μL，空白孔添加稀释缓冲液。
直接向各孔加入酶偶联工作液 55μL，缓慢摇晃混匀，封板膜严实密封板面。
37℃恒温孵育 68min，孵育过程不移动酶标板。
撕膜倒出孔内反应液，洗板液浸润每孔 30s，拍干，重复洗板 5 次。
每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 18min。
每孔加入终止液 50μL，充分晃动混匀终止显色。
酶标仪 450nm 测定 OD 吸光度值，以空白孔调零，依据标准曲线计算 Agrin 聚集蛋白浓度。
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