本试剂盒依托间接酶联免疫吸附试验原理,固相载体包被人角蛋白丝聚集素特异性抗原,待测样本中的AFA抗体可与固相抗原特异性结合;充分孵育后洗涤去除游离成分,加入辣根过氧化物酶标记二抗与目标抗体结合,再次洗涤去除未结合酶标试剂,加入底物催化显色,显色强度与样本中AFA抗体浓度正相关,通过标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒
英文名称:AFA Elisa Kit
货号:Y-E470
规格:48T/96T
灵敏度:最低可测 0.7AU/mL
检测范围:0.8AU/mL~16AU/mL
反应时间:样本温育 90min;二抗 45min;避光显色 12min
保存条件:2~8℃冷藏,底物液不可长时间暴露强光
显色系统:双组分 TMB 显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:梯度稀释标准品,采用四参数法绘制曲线进行定量
注意事项:试剂盒有效期内使用,过期试剂酶活性下降结果偏低
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

样本稀释:血清 1:112 稀释,混匀静置 9min,离心去除杂质沉淀。
各孔加入空白液、质控液、稀释样本 100μL。
一步法直接加酶标记抗原液 100μL,封板混匀。
37℃避光孵育 64min。
洗板 5 次,浸泡 33s 每次。
显色 17min,全程避光。
终止反应,酶标仪 450nm 测定吸光度。
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