本试剂盒运用间接酶联免疫吸附检测原理，固相载体酶标板包被高纯度军团菌抗原，待测样本中的军团菌IgM抗体与微孔内固相抗原特异性结合，经过洗板去除游离杂质后，加入酶标记的抗人IgM特异性二抗，形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，经底物显色、终止反应后，利用酶标仪检测吸光度，对照标准曲线即可定量分析样本中军团菌抗体IgM的表达水平。
基本参数：
产品名称：人军团菌抗体IgM(LP Ab-IgM )ELISA试剂盒
英文名称：LP Ab-IgM Elisa Kit
货号：Y-E597
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出限 0.12AU/mL
检测范围：0.2–12AU/mL
反应时间：捕获法包被板，样本孵育 100min，酶标二抗 45min，显色 18min，总时长 163min
保存条件：板条密封 2–8℃，底物液 2–8℃避光，终止液常温密封保存
显色系统：可溶性 TMB 显色底物
检测波长：450nm
标准曲线绘制：五点梯度标准品，四参数拟合曲线，用于定量 IgM 抗体浓度
注意事项：类风湿因子易干扰结果，高 RF 样本建议预处理；严禁使用反复冻融超过 3 次的血清
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
样本规范处理
血清样本严禁溶血，溶血样本直接废弃；血清样本 4℃可保存 2 天，长期储存分装密封 - 20℃冻存，复融后充分涡旋混匀再检测。
试剂盒平衡稀释
所有试剂室温静置 32min；浓缩洗涤液用去离子水稀释配制工作液，单次实验按需配制，不可长期存放稀释后洗涤液。
标准品孔布设
IgM 标准品复溶后进行梯度稀释，从高浓度到低浓度依次加样 50μL 至标准品孔，设置阳性对照孔、阴性对照孔各一孔。
一步法加样孵育
待测样本每孔 50μL，随即加入酶标二抗工作液 50μL，封板膜封口，37℃恒温孵育 55min。
微孔洗涤操作
弃液后每孔加满洗涤液，浸泡 30s，拍干，重复洗板 5 次，操作过程避免孔间液体交叉滴落。
避光显色培育
每孔加入显色液 A、B 各 50μL，轻柔混匀，遮光 37℃反应 14min，不可强光直射酶标板。
终止上机检测
加入终止液终止反应，10min 内使用酶标仪 450nm 读数，根据临界值判定军团菌 IgM 抗体阴阳性结果。
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