人谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量检测样本中人谷氨酸脱氢酶含量。试剂盒固相载体包被GDH特异性捕获抗体，待测样本中的GDH抗原与固相抗体特异性结合，洗除未结合成分后，加入酶标记GDH检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物，经充分洗涤去除游离酶标抗体，加入显色底物进行酶促反应，显色强度随样本中GDH浓度升高而增强，通过酶标仪测定吸光度，结合标准曲线可准确计算样本中GDH的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出 0.06U/L

检测范围：0.1~12.8U/L

反应时间：抗原抗体结合 60min，酶促显色 22min

显色系统：TMB 显色，硫酸终止

检测波长：450nm

特异性：识别人肝脏来源 GDH，其他脱氢酶交叉反应＜2.5%

重复性：板内 CV≤5.2%，板间 CV≤7.2%

注意事项：溶血样本红细胞内酶会造成结果偏高，严禁使用溶血血清
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂室温平衡 33min，梯度稀释 GDH 标准品，排布标准孔、细胞裂解待测孔、空白孔。

各微孔加入 50μL 标准品或离心上清待测样品，空白孔补充样本稀释液。

直接加入酶偶联抗 GDH 抗体 100μL，封板，37℃恒温孵育 75min 一步夹心结合。

洗板 5 轮，每轮洗涤液浸泡 32s，拍干微孔内部废液无挂壁。

单孔加入显色混合底物液 100μL，室温避光显色 16min。

加入终止液 50μL 终止催化反应，横向摇晃微孔板混匀。

酶标仪 450nm 读取吸光度，换算标准曲线得到样本 GDH 活性含量。