本试剂盒运用间接ELISA检测原理，酶标板微孔包被纯化的蛋白酶3(PR3)抗原，加入待测样本后，样本中的抗PR3-IgG抗体与固相PR3抗原特异性结合，洗涤去除游离杂质，加入酶标记抗人IgG特异性二抗孵育结合，经显色、终止反应后检测吸光度，对照标准曲线定量检测样本中抗蛋白酶3抗体IgG的浓度。
基本参数：
产品名称：人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA试剂盒
英文名称：PR3 Ab-IgG Elisa Kit
货号：Y-E521
规格：48T/96T
灵敏度：0.2AU/mL
检测范围：0.4–32AU/mL
反应时间：室温孵育 90min，酶标二抗 60min，避光显色 15min
保存条件：试剂盒 2～8℃，终止液常温保存，不可冷藏
显色系统：稳定型 TMB 单液显色
检测波长：450nm
标准曲线绘制：7 梯度标准品线性拟合曲线计算 IgG 抗体含量
注意事项：韦格纳肉芽肿相关指标；类风湿因子需预处理避免假阳性
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
血清样本制备
静脉血室温凝固 40min，3500rpm 离心 12min 分离血清，无黄疸溶血方可检测。
试剂稀释回温
所有试剂室温放置 28min，20× 浓缩洗涤液 1:19 稀释混匀备用。
标准品系列加孔
PR3-IgG 标准品复溶倍比稀释 7 梯度，每标准微孔加样 50μL，设立阴阳对照。
样本共孵育操作
待测样本 50μL，加入 HRP 标记 PR3 抗原液 50μL，封板 37℃孵育 56min。
微孔洗涤流程
弃液后洗涤液浸泡 35s 拍干，连续洗板 6 次，每次充分扣干板条残留液体。
底物显色孵育
每孔加入显色底物液 100μL，避光 37℃显色 15min。
终止上机检测
终止液终止酶反应，450nm 读取 OD 值，定量样本 PR3-IgG 抗体浓度。
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