人黑素瘤衍生亮氨酸拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术检测人黑素瘤衍生亮氨酸拉链额外核因子（MLZE）含量，微孔板包被MLZE特异性捕获抗体，待测样本中的MLZE抗原与固相抗体特异性结合，洗涤后加入酶标记检测抗体形成稳定的夹心免疫复合物，经酶促显色、终止反应后测定吸光度，吸光度值与样本中MLZE浓度成正比，结合标准曲线可精准定量检测目标核因子含量。
产品参数：

‌灵敏度：检出下限 0.09ng/mL

检测范围：0.10ng/mL～62ng/mL

反应时间：抗原孵育 66min，酶结合物 39min，总 142min

显色系统：双液 TMB 显色终止套装

检测波长：450nm，辅助 610nm

特异性：核定位 MLZE 蛋白专属识别，胞浆同源蛋白无结合

重复性：板内 CV＜6.4%，板间 CV＜9.4%

注意事项：裂解液需去除细胞核碎片，避免基质干扰
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，配制工作洗涤液，拆分微孔板条，未使用板条避光冷藏。

倍比稀释 MLZE 标准品，细胞裂解上清样本离心去除杂质后稀释。

各微孔加入标准品、待测样本、空白对照液，同步加入酶标记抗体工作液，封板。

37℃避光孵育 66min。

弃净孔内液体，洗涤液浸泡 45s，拍干，重复洗板 5 次。

加入显色底物避光显色 16min。

终止液终止显色，450nm 酶标仪测 OD 值，计算样本 MLZE 浓度。