本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法,固相载体包被MLC特异性捕获抗体,待测样本中的肌球蛋白轻链可与固相抗体发生特异性免疫结合,孵育结合后加入酶标记MLC检测抗体,形成稳定的夹心免疫复合物,充分洗涤洗除未结合杂质后,加入底物发生酶促显色反应,有色产物的吸光度值与样本中MLC浓度呈正相关,通过标准曲线拟合计算,可定量检测样本中MLC的含量。
产品参数:
产品名称 | 人肌球蛋白轻链(MLC)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2545 |
英文名称 | MLC ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤0.1ng/mL
检测范围:0.25ng/mL~8ng/mL
反应时间:37℃样本孵育 65min;酶结合物 40min;避光显色 10min
保存条件:2~8℃避光保存,严禁冷冻冻裂试剂瓶;失效试剂不可混用
显色系统:TMB 底物显色体系
检测波长:450nm/630nm 双波长
标准曲线绘制:7 点标准品梯度,四参数法绘制曲线,复孔检测取均值计算
注意事项:心肌组织匀浆样本需充分离心去除沉淀;操作佩戴一次性手套防止蛋白污染
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
样本预处理:心肌 / 骨骼肌组织匀浆离心取上清,血清样本避免溶血,按照试剂盒要求比例稀释样本,涡旋振荡 1min 混匀。
微孔板加样排布:MLC 包被酶标板分设空白、标准品、待测样本孔,每孔加入对应液体 100μL,标准品从高浓度到低浓度依次添加。
一步法添加酶标记抗体:直接向所有孔内加入 HRP 标记检测抗体 60μL,封板前轻晃混匀。
避光恒温孵育:37℃封闭孵育 60min,保证抗原与包被抗体、酶标抗体夹心结合。
洗涤去除游离杂质:倾倒孔内液体,洗涤液浸泡洗板 4 次,每次浸泡 25s,吸水纸拍干残留液体。
底物显色培育:每孔分别加入显色 A、B 液各 50μL,避光 37℃显色 14min。
终止检测分析:滴加终止液 50μL,酶标仪 450nm 读取吸光度,计算样本 MLC 浓度。
关键字: 人肌球蛋白轻链;MLC;ELISA试剂盒;
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