本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板固相包被MLCK特异性抗体,加入待测样本后,样本中的肌球蛋白轻链激酶与固相捕获抗体特异性结合,再加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合体系,洗涤去除游离反应物后,底物经酶催化显色,显色强度与样本中MLCK含量成正比,检测吸光度并对照标准曲线,即可完成样本中MLCK的定量分析。
产品参数:
产品名称 | 人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3059 |
英文名称 | MLCK Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.09ng/mL
检测范围:0.3ng/mL~9.6ng/mL
反应时间:样本孵育 95min;二抗孵育 42min;显色避光 16min
保存条件:试剂盒 2~8℃;显色液单独避光存放,不可与终止液混放
显色系统:A 液氧化剂 + B 液显色底物双组分显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:扣除空白孔 OD 值后,线性拟合标准曲线,稀释样本结果换算原始浓度
注意事项:洗涤步骤每孔注液不少于 300μL,洗板充分减少非特异性结合
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
样本制备:细胞裂解液提取上清、血清样本解冻后稀释,离心去除沉淀杂质,置于冰上待用。
酶标板上样:取出 MLCK 预包被 96 孔板,标记孔位,样本孔加稀释待测液 100μL,标准品孔添加梯度标准品,空白孔补稀释缓冲液。
共加酶偶联抗体:不洗板直接加入酶标记二抗工作液 55μL,水平摇匀酶标板。
密封孵育反应:封板膜封口,37℃避光孵育 65min。
洗板流程:弃去孔液,洗涤液注满每孔,浸泡 30s 拍干,重复洗板 5 次。
显色反应:加入 TMB 显色液 100μL,37℃避光显色 17min。
终止读数:加入终止液终止反应,450nm 波长检测 OD 值,对照标准曲线算出 MLCK 含量。
关键字: 人肌球蛋白轻链激酶;MLCK;ELISA试剂盒;
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