本试剂盒运用针对IgM抗体的间接ELISA检测原理,固相酶标板包被巨细胞病毒特异性抗原,待测样本中的抗CMV IgM抗体可与固相抗原特异性结合;洗涤去除游离杂质后,加入酶标记抗人IgM特异性二抗孵育结合,充分洗涤后加入底物触发酶促显色反应,通过检测吸光度值,精准定量样本中anti-CMV IgM抗体的含量。
基本参数:

产品名称:人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMV IgM)ELISA试剂盒
英文名称:anti-CMV IgM ELISA Kit
货号:Y-E2720
规格:48T/96T
灵敏度:检出下限 0.08IU/mL
检测范围:0.125IU/mL~8IU/mL
反应时间:室温孵育 80min;酶结合物 42min;避光显色 15min
保存条件:2~8℃避光防冻,板条独立分装防交叉污染
显色系统:HRP-TMB 单液显色体系
检测波长:450nm,参比 620nm
标准曲线绘制:倍比稀释标准品绘制线性标准曲线,半定量判定阴阳性与滴度
注意事项:类风湿因子阳性样本需经吸附处理后再检测,避免假阳性
实验前准备工作:

1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
实验步骤如下:

样本处理:血清 1:118 稀释,涡旋混匀,室温静置 10min。
酶标板分孔加样,每孔 100μL。
一步加入酶标记抗人 IgM 工作液 100μL,密封封板。
37℃避光孵育 66min。
洗板 5 次,浸泡 36s 拍干。
避光显色 18min。
终止后检测 OD 值,判定近期感染指标。
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