本试剂盒运用间接ELISA检测原理,酶标板固相包被风疹病毒抗原,待测样本中的抗风疹病毒IgM抗体与微孔内固相抗原特异性结合,洗板去除游离杂质,加入酶标记抗人IgM特异性二抗孵育反应,经显色、终止反应后检测吸光度,对照标准曲线定量检测样本中anti-RV IgM抗体的表达水平。
基本参数:

产品名称:人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RV IgM)ELISA试剂盒
英文名称:anti-RV IgM ELISA Kit
货号:Y-E2734
规格:48T/96T
灵敏度:0.12AU/mL
检测范围:0.24–28AU/mL
反应时间:捕获法孵育 100min,二抗 45min,显色 18min,总 163min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光,板条密封防失水
显色系统:稳定型 TMB 显色液
检测波长:450/630nm
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,定量判定近期急性感染
注意事项:类风湿因子极易造成假阳性,建议使用 RF 吸附剂预处理样本
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

样本离心提纯
血清样本 12000rpm 离心 10min 去除杂质,类风湿因子干扰样本建议预处理后再检测。
试剂回温准备
全套试剂室温平衡 29min,浓缩洗涤液用去离子水稀释配比混匀。
标准品梯度稀释
风疹 IgM 标准品复溶倍比稀释 7 个浓度梯度,每标准孔加样 50μL,预留空白对照孔。
样本共孵育温育
待测样本 50μL,加入 HRP 标记风疹病毒抗原液 50μL,密封酶标板,37℃孵育 57min。
洗板除杂操作
倒掉孔内液体,洗涤液浸泡 35s 拍干,连续洗板 4 次,吸水纸压干板条。
底物避光显色
添加 TMB 显色液 100μL,37℃避光显色 16min。
终止读数判定
终止液终止反应,450nm 读取 OD 值,对照临界值判定风疹 IgM 抗体结果。
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