本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,固相微孔板固定LUM特异性捕获抗体,待测样本中的基膜聚糖可与固相抗体特异性结合,随后加入酶标记LUM检测抗体形成稳定夹心复合物,洗涤去除未结合的游离蛋白与抗体后,添加底物液触发酶促显色反应,显色深浅对应样本中LUM的浓度高低,通过酶标仪读数及标准曲线计算,可精准定量样本中LUM的表达水平。
产品参数:
产品名称 | 人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2629 |
英文名称 | LUM ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤0.2ng/mL
检测范围:0.4ng/mL~12.8ng/mL
反应时间:样本室温孵育 80min;二抗 40min;显色 19min
保存条件:试剂盒 2~8℃;显色液必须避光单独存放,见光易失效
显色系统:HRP-TMB 单液显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:6 点标准梯度,酶标仪内置程序自动生成标准曲线与样本浓度
注意事项:所有试剂使用前混匀,沉淀试剂禁止使用
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
样本制备:细胞培养上清、组织匀浆上清经稀释处理,涡旋振荡混匀,避免反复冻融。
微孔板加样:LUM 包被 96 孔板,标准品与待测样本每孔加入 100μL,空白孔添加稀释缓冲液。
同步添加酶标结合物:无前置洗板,直接加入酶标记检测抗体 50μL,水平摇匀。
封板孵育:37℃避光孵育 65min。
多轮洗板:洗涤液洗板 4 次,浸泡 25s 后拍干废液。
避光显色:加入 TMB 显色底物,37℃显色 15min。
终止检测:终止液终止反应,450nm 读取吸光度,计算样本 LUM 表达量。
关键字: 人基膜聚糖/内腔蛋白;LUM;ELISA试剂盒;
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