人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术，固相载体包被MMP11特异性捕获抗体，待测样本中的基质金属蛋白酶11与固相抗体特异性结合，孵育结束后加入酶标记MMP11检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体夹心结构，洗涤去除游离杂质后，底物经酶催化显色，显色强度与样本中MMP11含量成正比，检测吸光度后结合标准曲线可精准定量其浓度。
产品参数：

‌灵敏度：≤0.09ng/mL

检测范围：0.2ng/mL~6.4ng/mL

反应时间：样本孵育 72min；二抗孵育 36min；显色 16min

保存条件：整套试剂盒 2~8℃避光密封保存，有效期 6 个月

显色系统：可溶性 TMB 底物显色

检测波长：450nm

标准曲线绘制：空白孔归零后，以浓度 - OD 值建立标准曲线，外推计算样本数值

注意事项：操作环境避免强光直射，防止显色底物提前氧化变色
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

样本前处理：肿瘤组织上清、血清样本稀释后离心去除杂质，冰上暂存防止蛋白降解。

微孔板加样：MMP11 特异性包被板，各孔添加标准品、稀释待测样本、空白稀释液 100μL。

共加酶偶联抗体：无需预洗板，加入酶标记工作液 60μL，轻晃混匀。

封板避光孵育：37℃恒温孵育 72min。

洗涤步骤：洗涤缓冲液洗板 6 次，每次浸泡 30s，倒置吸干液体。

显色反应：加入显色底物混合液，37℃避光显色 17min。

终止定量检测：终止液终止反应，450nm 波长读数，计算 MMP11 含量。