本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板固相包被MMP-2特异性捕获抗体,加入待测样本与标准品,样本中的MMP-2抗原与固相抗体特异性结合,随后加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物,充分洗涤去除未结合物质后,加入底物进行酶促显色,有色产物的吸光度值与样本中MMP-2浓度正相关,通过标准曲线计算可定量检测其含量。
产品参数:
产品名称 | 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3118 |
英文名称 | MMP-2 Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.05ng/mL
检测范围:0.15ng/mL~4.8ng/mL
反应时间:37℃孵育 62min;酶结合物 28min;避光显色 15min
保存条件:2~8℃冷藏;剩余板条干燥剂一同密封入袋冷藏
显色系统:TMB 单组份显色液
检测波长:450nm,参比 630nm
标准曲线绘制:7 梯度标准品,非线性拟合标准曲线,样本超量程需稀释重测
注意事项:样本不可加入叠氮钠、硫柳汞等酶抑制剂,会终止显色反应
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
样本制备:细胞上清、体液样本过滤稀释,去除蛋白沉淀,混匀备用。
酶标板加样:MMP-2 包被板设置复孔,标准品与样本孔单孔加样 100μL,空白孔做阴性对照。
一步添加酶标二抗:所有孔位加入 HRP 标记抗体 50μL,封板密封。
孵育反应:37℃避光孵育 60min。
洗板除杂:洗板 5 次,每次浸泡 28s,拍干孔内残留洗液。
底物显色:加入显色液避光孵育 12min。
终止读数:终止液终止显色,酶标仪检测 OD 值,换算 MMP-2 浓度。
关键字: 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A;MMP-2/GelatinaseA;ELISA试剂盒;
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