本试剂盒基于间接ELISA检测原理,酶标板固相包被人类固醇生成细胞特异性抗原,待测样本中的抗类固醇生成细胞SCA抗体可与固相抗原特异性结合;充分孵育后洗涤去除游离成分,加入辣根过氧化物酶标记二抗与目标抗体配对结合,再次洗涤去除未结合酶标试剂,加入底物显色,显色深浅与样本中SCA抗体浓度成正比,实现精准定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗类固醇生成细胞抗体(SCA)ELISA试剂盒
英文名称:SCA Elisa Kit
货号:Y-E400
规格:48T/96T
灵敏度:最低可测 0.7AU/mL
检测范围:0.75AU/mL~16AU/mL
反应时间:样本结合 75min;二抗 40min;显色 12min
保存条件:试剂盒 2~8℃防冻,浓缩洗涤液低温静置若结晶温水化开
显色系统:双组份 TMB 等量混合显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,适合高低浓度样本精准测定
注意事项:待测样本不可反复冻融超过 2 次,蛋白降解会导致结果偏低
通用注意事项:

样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下:

样本稀释:血清 1:104 稀释,混匀静置 7min,去除絮状沉淀。
酶标板孔位加样 100μL / 孔。
一步加入酶标二抗工作液 100μL,封板密封。
37℃避光孵育 59min。
洗板 5 次,浸泡 34s 拍干。
避光显色 16min。
终止反应后测定 OD 值,出具检测报告。
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