本试剂盒基于捕获法ELISA检测原理,针对人流行性出血热病毒特异性IgM抗体进行检测,微孔板预包被抗人IgMμ链抗体,可捕获待测样本中所有IgM类抗体;若样本中存在抗流行性出血热病毒IgM抗体,将被固相抗体捕获,随后加入纯化的流行性出血热病毒特异性抗原,与捕获的目标IgM抗体结合;再加入酶标记抗病毒抗原抗体,形成固相捕获抗体-目标IgM-病毒抗原-酶标抗体复合物,经底物显色、终止反应后,吸光度值与样本中EHF-IgM抗体含量正相关,可通过标准曲线定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗流行性出血热病毒抗体IgM (EHF)ELISA试剂盒
英文名称:EHF IgM Elisa Kit
货号:Y-E548
规格:48T/96T
灵敏度:阳性临界值 OD 差值≥0.1 判定检出
检测范围:阴性质控~强阳性质控梯度血清稀释 1:100~1:1600
反应时间:样本捕获孵育 90min,酶结合物 60min,显色 20min
保存条件:试剂盒 2~8℃,灭活阳性对照血清 - 20℃分装冻存,避免反复冻融
显色系统:TMB 底物显色系统
检测波长:450/630nm 双波长
标准曲线绘制:采用阳性对照梯度稀释做半定量曲线,定性检测可仅设置阴阳性对照不做定量曲线
注意事项:样本必须 56℃30min 灭活处理;操作全程生物安全二级防护,防止样本污染
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温静置 30min,取出微孔反应板,规划布局并标注孔位,剩余板条密封 2-8℃存放。
待测稀释样本加入对应孔 60μL,阴性对照、阳性对照孔分别添加对应对照液 60μL,空白孔空置不加样。
直接向所有加样孔加入酶标抗体工作液 60μL,封板膜密封,轻柔震荡酶标板混匀体系。
37℃恒温孵育 65min,孵育期间禁止挪动酶标板位置。
撕掉封板膜,弃净孔内液体,洗涤液注满每孔浸泡 30s 弃去,连续洗板 5 次,拍干残留洗液。
每孔依次添加显色 A 液、B 液各 50μL,避光混匀,37℃避光显色 14min。
加入终止液 50μL 终止反应,混匀后酶标仪 450nm 读数,依据标准品曲线判定样本 IgM 抗体阳性 / 阴性及含量。
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