本试剂盒运用双抗体夹心ELISA原理,固相载体包被HSL特异性捕获抗体,待测样本中的激素敏感性脂肪酶与固相抗体特异性结合,孵育后加入酶标记HSL检测抗体形成稳定夹心复合物,洗涤去除多余游离蛋白与抗体后,加入底物催化显色,有色产物的吸光度值与样本中HSL含量正相关,对照标准曲线即可精准定量样本中HSL的表达水平。
产品参数:
产品名称 | 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3041 |
英文名称 | HSL Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤0.1ng/mL
检测范围:0.2ng/mL~6.4ng/mL
反应时间:样本孵育 84min;二抗 41min;显色 19min
保存条件:整套试剂 2~8℃密封保存,开封后 1 个月内使用完毕
显色系统:双组份 TMB 显色底物
检测波长:450nm
标准曲线绘制:扣除空白 OD 值,四参数拟合生成标准曲线方程计算浓度
注意事项:组织样本提取时全程低温操作,抑制脂肪酶蛋白降解
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
样本制备:脂肪组织裂解上清、血清样本稀释混匀,避免蛋白长时间室温放置降解。
微孔板加液:HSL 包被微孔板,梯度标准品、待测样本、空白孔单孔加样 100μL。
共加酶偶联抗体:不前置洗板,直接加入酶标记工作液 55μL,轻晃混匀封板。
孵育结合反应:37℃避光孵育 67min。
洗涤除游离反应物:洗板 5 次,每次浸泡 32s,吸水纸拍干微孔。
底物显色:加入显色 A、B 液各 50μL,避光显色 18min。
终止上机定量:终止液终止反应,450nm 波长读取 OD 值,计算 HSL 含量。
关键字: 人激素敏感性脂肪酶;HSL;ELISA试剂盒;
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