本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,酶标板微孔预先包被抗人周期素依赖性激酶2特异性抗体,加入梯度标准品及待测样本后,样本中的CDK-2抗原与固相捕获抗体特异性结合,洗涤去除未结合组分,加入酶标记CDK-2检测抗体形成免疫夹心结构,经显色、终止反应后检测吸光度,结合标准曲线精准测定样本中CDK-2的含量。
基本参数:

产品名称:人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒
英文名称:CDK-2 Elisa Kit
货号:Y-E886
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.16ng/mL
检测范围:0.32ng/mL - 20.48ng/mL
反应时间:固相结合 50min,酶标记孵育 40min,显色 16min
保存条件:未拆封试剂盒 2~8℃避光保存
显色系统:OPD 底物显色体系
检测波长:492nm
标准曲线绘制:复孔检测标准梯度,去除离群值后绘制标准曲线
注意事项:裂解液需添加磷酸酶抑制剂,磷酸化修饰会影响抗体识别效率
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 31min,倍比稀释 CDK-2 标准品,肿瘤细胞裂解上清稀释预处理,对酶标板分组标记。
一孔一枪头完成加样,空白孔加稀释液,标准品孔加梯度 CDK-2 标准品,样本孔加入待测裂解样本。
直接向全部微孔加入酶标记抗体工作液,手动摇晃酶标板混匀孔内反应体系。
封板封口后 37℃湿盒避光孵育 62min,保证孵育环境恒温恒湿。
倾倒废液,洗板液洗板 5 次,每次浸泡 29s,吸水纸吸干微孔残留洗涤液。
避光添加显色底物混合液,37℃避光显色 17min,梯度显色清晰后终止。
终止液终止显色,酶标仪 450nm 检测吸光度,计算 CDK-2 浓度数值。
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