人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附检测原理，微孔板预包被纯化的人脑组织特异性抗原，待测样本中存在的抗脑组织抗体可与固相抗原特异性结合，形成固相抗原-抗体复合物；洗除未结合的杂蛋白与游离成分后，加入酶标记抗人二抗，与复合物中的ABAb特异性结合，完成二次孵育后再次洗板；加入显色底物进行酶促显色反应，终止反应后测定吸光度，吸光度数值与样本中抗脑组织抗体含量成正比，对照标准曲线即可完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒

英文名称：ABAb     Elisa Kit
货号：Y-E426

规格：48T/96T

灵敏度：0.7U/mL

检测范围：1.4U/mL - 44.8U/mL

反应时间：37℃孵育 80min，酶结合物 40min，显色 16min

保存条件：试剂盒 2~8℃，终止液常温保存，其余试剂禁止室温放置超过 2h

显色系统：HRP-TMB 显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：设置空白孔与 6 个梯度标准品，以 OD 值对应浓度建立拟合曲线

注意事项：脑外伤、脑炎急性期样本抗体水平偏高，需结合病史解读数据
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 32min，取出预装包被微孔板，标记各组孔位，未使用板条密封冷藏保存。

待测稀释样本加入样本孔 55μL，阴阳性对照孔加入对应对照试剂 55μL，空白孔空置。

直接向全部检测孔添加酶标记抗原工作液 55μL，封板密封，缓慢震荡混匀孔内反应体系。

37℃恒温培养箱孵育 62min，酶标板水平放置不可倾斜。

撕开封板膜，倾倒废液，洗涤液加满每孔浸泡 32s 后甩干，循环洗板 5 次，彻底拍干微孔。

每孔依次加入显色液 A、B 各 50μL，避光环境下 37℃显色 11min，严控显色时间。

滴加终止液 50μL 终止酶促反应，混匀后 450nm 读取 OD 值，结合标准曲线计算抗体含量。
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