本试剂盒基于间接ELISA检测原理,微孔板预包被纯化的人浦肯野细胞Yo抗原,待测样本中的抗浦肯野细胞(Yo)抗体可特异性结合固相Yo抗原,形成抗原-抗体复合物;经洗涤去除未结合杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的抗人二抗,与复合物中的PCA-1/Yo抗体特异性结合;再次洗板后加入显色底物进行酶促反应,显色深浅与样本中目标抗体含量正相关,终止显色后检测吸光度,对照标准曲线可精准定量样本中PCA-1/Yo抗体水平。
基本参数:

产品名称:人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒
英文名称:PCA-1/Yo Elisa Kit
货号:Y-E443
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.55RU/mL
检测范围:1.1RU/mL - 35.2RU/mL
反应时间:37℃孵育 90min,酶标二抗 50min,显色 22min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光,阳性质控品 - 20℃分装冻存,避免反复冻融 3 次以上
显色系统:TMB 单组分显色液
检测波长:450nm
标准曲线绘制:半定量检测,采用阳性对照梯度稀释绘制参照曲线,定性判读阴阳性
注意事项:多合并妇科肿瘤副肿瘤综合征,检测结果需联动影像学与肿瘤标志物检查
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 38min,取出包被微孔板,规划孔位排布并做好标记,剩余板条密封避光冷藏。
待测稀释样本加入样本孔 50μL,阴性、阳性对照孔加入对应对照品 50μL,空白孔空置不加液。
直接向所有非空白孔添加酶标记结合液 50μL,封板严实密封,低速震荡混匀反应体系。
37℃恒温孵育 75min,全程酶标板平放不可堆叠放置。
去除封板膜,倒净废液,洗涤液注满每孔浸泡 42s 后甩干,重复洗板 6 次,充分去除未结合游离物。
每孔加入显色底物液 100μL,避光 37℃显色 9min,精准把控显色时长。
加入终止液 50μL 终止反应,混匀后酶标仪 450nm 读取吸光值,绘制标准曲线定量检测结果。
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