本试剂盒基于抗原抗体特异性结合及酶催化显色的间接ELISA原理,固相酶标板包被有人肝细胞胞质1型特异性抗原,待测样本中的LC1抗体可与固相抗原特异性结合形成免疫复合物;洗涤去除未结合物质后,加入辣根过氧化物酶标记二抗特异性结合免疫复合物中的一抗,再次洗涤后加入底物发生显色反应,终止显色后测定吸光度,显色深浅与样本中LC1抗体浓度正相关,从而实现定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA试剂盒
英文名称:LC1 Elisa Kit
货号:Y-E437
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.7AU/mL
检测范围:0.8AU/mL~25.6AU/mL
反应时间:样本孵育 80min;酶标记物孵育 30min;显色 15min
保存条件:试剂盒 2~8℃,不可冷冻;终止液常温避光存放即可
显色系统:A、B 液混合显色系统
检测波长:450nm/630nm 双波长
标准曲线绘制:四参数 Logistic 回归建模,自动拟合曲线读取样本数值
注意事项:洗板每孔注液量需一致;显色必须严格控时,超时结果失真
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

样本制备:人血清样本 1:75 稀释,反复吹打混匀,室温静置 5min,沉淀样本离心取上清。
分孔加样:规划空白、阴阳对照、样本孔,每孔加入对应液体 100μL,做好标记区分样本编号。
一步法共加酶结合物:所有孔直接添加酶标记 LC1 抗原工作液 100μL,封板后震荡混匀 30s。
温育结合:37℃避光孵育 55min,放置于水平摇床低速晃动孵育。
洗板洗涤:弃净孔内液体,洗涤液浸泡每孔 25s,拍干,连续洗板 4 次。
底物显色:每孔加入 TMB 显色液 100μL,室温避光显色 16min。
终止读数:加入终止液终止反应,酶标仪 450nm 测定吸光值,参照试剂盒判定标准出具结果。
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