本试剂盒采用间接ELISA核心原理，微孔板固相包被纯化的人软骨组织特异性抗原，待测样本中的抗软骨抗体可与固相抗原特异性免疫结合，孵育结束后洗除游离杂质与非特异性结合物质；加入辣根过氧化物酶标记的抗人二抗，与固相上的目标抗体精准结合，构建完整免疫反应体系；底物酶促显色后，显色深浅随anti-cartilage-Ab含量升高而加深，终止显色后检测吸光度，结合标准曲线可定量测定样本中抗软骨抗体浓度。
基本参数：
产品名称：人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA试剂盒
英文名称：anti-cartilage-antibody Elisa Kit
货号：Y-E423
规格：48T/96T
灵敏度：0.6U/mL
检测范围：1.2U/mL - 38.4U/mL
反应时间：37℃温育 70min，酶标液 38min，显色 16min
保存条件：全套试剂 2~8℃，洗涤工作液现配现用，不可隔夜留存
显色系统：A/B 双液混合后显色
检测波长：450nm
标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合标准曲线，软件自动输出定量数值
注意事项：类风湿关节炎、骨关节病样本易升高，需结合关节影像学综合诊断
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 27min，取出微孔反应板，划分孔位并编号，多余板条密封放置 2~8℃环境保存。
待测稀释样本单孔加样 95μL，阴阳性对照孔添加对应对照液 95μL，空白孔不滴加液体。
一步法直接加入酶标记抗体工作液 95μL 至所有非空白孔，封板膜密封，缓慢震荡混匀。
37℃恒温培养箱孵育 46min，酶标板水平摆放，勿受压堆叠。
撕开封板膜，倒净孔内废液，洗涤液注满每孔浸泡 25s 甩干，重复洗板 4 次，彻底拍干微孔残留洗液。
分别向每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL，避光混匀，室温避光显色 16min。
加入终止液 50μL 终止反应，混匀后 450nm 测定 OD 值，依据标准曲线定量样本抗体浓度。
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