本试剂盒基于间接酶联免疫吸附检测原理,微孔板预包被纯化的人腮腺管特异性抗原,待测样本中的抗腮腺管抗体可与固相抗原特异性结合,形成稳定的抗原-抗体复合物;经洗涤去除未结合成分后,加入酶标记抗人二抗与目标抗体结合,再次洗板去除游离酶标抗体;加入显色底物进行酶促反应,显色强度与样本中anti-parotid duct Ab含量呈正相关,终止反应后检测吸光度,通过标准曲线实现精准定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗腮腺管抗体(anti-parotid duct Ab)ELISA试剂盒
英文名称:anti-parotid duct antibody Elisa Kit
货号:Y-E422
规格:48T/96T
灵敏度:0.48AU/mL
检测范围:0.96AU/mL - 30.72AU/mL
反应时间:孵育两步分别 58min、42min,避光显色 12min
保存条件:2~8℃避光,终止液远离碱性试剂存放
显色系统:HRP 介导 TMB 显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:6 个浓度梯度,剔除异常值后做非线性回归曲线
注意事项:干燥综合征辅助检测,唾液腺急性炎症可出现一过性阳性
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温静置 33min,取出包被微孔板,标记空白孔、对照孔、待测样本孔,拆分多余板条密封冷藏。
稀释后待测样本加入样本孔 58μL,阴性、阳性对照孔加入对应对照品 58μL,空白孔不加任何试剂。
直接向所有检测孔添加酶标记抗原液 58μL,封板严实封口,低速震荡酶标板混匀反应液。
37℃恒温孵育 66min,全程环境温度恒定,禁止随意挪动板体。
揭膜倒掉废液,洗涤液灌满每孔浸泡 38s 后弃除,循环洗板 5 次,吸水纸用力拍干微孔。
每孔依次滴加显色 A、B 液各 50μL,避光条件下 37℃显色 10min。
加入终止液 50μL 终止酶促反应,混匀后酶标仪 450nm 读取吸光值,对照标准曲线计算抗体含量。
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