本试剂盒基于竞争酶联免疫吸附法原理进行检测,将特异性识别甲肟前列腺素D2的抗体固定于微孔板固相载体上,向孔内加入待测样本和酶标记PGD2-MOX抗原,样本中的靶标物质与酶标记抗原竞争结合固相抗体的特异性结合位点;经过恒温孵育、充分洗涤去除未结合组分后,加入显色底物催化显色,酶促反应的显色强度与样本中甲肟前列腺素D2含量成反比,通过检测吸光度数值,匹配标准曲线即可定量分析样本中靶标的浓度水平。
产品参数:
产品名称 | 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2927 |
英文名称 | PGD2-MOX ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检测值 7.2pg/mL
检测范围:15~480pg/mL
反应时间:包被板加样孵育 90min,酶标二抗 60min,避光显色 20min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光;标准品干粉 - 20℃分装冻存,溶解后一次性使用
显色系统:HRP 催化 TMB 显色,酸性终止后由蓝转黄
检测波长:450nm,建议 570nm 做空白校正
标准曲线绘制:选用二次多项式拟合标准曲线,梯度标准品对应 OD 值录入软件生成拟合方程
注意事项:样本采集后立即酸化处理;全程避光操作防止前列腺素降解;板条剩余部分密封防潮冷藏
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 28min,分装酶标条,划分标准孔、样本孔、空白对照孔,每孔加入预处理待测样本 100μL,空白孔加入稀释缓冲液。
直接向全部加样孔加入酶偶联抗体工作液 50μL,横向缓慢晃动酶标板混匀液体,使用封板膜严实密封板面。
37℃条件下水浴孵育 65min,保证酶标板底面完全贴合水浴板架,保证温度一致。
去除封板膜,倒掉孔内反应液,每孔加满洗涤液浸润 35s 后倒扣拍干,连续洗板 5 轮,严禁孔内留存洗涤废液。
每孔分别添加底物显色 A 液、B 液各 50μL,遮光条件下 37℃孵育 18min 进行显色反应。
按顺序每孔加入终止液 50μL,轻震酶标板混匀,强制终止底物催化显色过程。
15min 内使用酶标仪 450nm 读值,空白孔归零,依据标准曲线定量样本 PGD2-MOX 含量。
关键字: 人甲肟前列腺素D2;PGD2-MOX;ELISA试剂盒;
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