本试剂盒基于ELISA双抗原夹心法原理,将特异性胸腺细胞球蛋白抗原包被于微孔板,待测样本中的抗胸腺细胞球蛋白抗体(ATG)与固相抗原结合,再加入酶标记同源抗原,形成固相抗原-待测抗体-酶标抗原的夹心复合物,洗涤去除未结合物质后底物显色,吸光度数值与样本中ATG抗体含量正相关,可完成样本抗体的定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)ELISA试剂盒
英文名称:ATG Elisa Kit
货号:Y-E439
规格:48T/96T
灵敏度:最低可测 0.7 μg/L
检测范围:0.4 μg/L ~ 25 μg/L
反应时间:样本孵育 80min,二抗孵育 40min,显色 15min
保存条件:2~8℃冷藏,不可冷冻;剩余板条装入自封袋加干燥剂密封
显色系统:TMB 底物显色体系,硫酸终止反应
检测波长:450nm/630nm 双波长校正读数
标准曲线绘制:以标准品稀释梯度对应 OD 值建立四参数标准曲线,外标法计算待测样本浓度
注意事项:标本采集后尽快检测,-20℃可短期冻存,避免反复冻融
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒全部试剂室温放置 28min,取出酶标板,设置空白孔、阳性对照孔、阴性对照孔、待测样本孔。
空白孔不加试剂,其余孔加入对应标准品 / 待测样本 50μL,即刻加入酶偶联物工作液 50μL,封板密封。
水平震荡混匀 1min,37℃恒温孵育 58min。
撕膜倒净孔内液体,洗涤液加满微孔浸泡 28s,吸水纸拍干,洗板循环 5 次。
每孔加入显色底物 A、B 各 50μL,避光条件下 37℃显色 16min。
快速加入终止液 50μL 混匀,终止显色。
酶标仪 450nm 测 OD 值,根据标准曲线核算 ATG 含量。
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