本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的人淋巴细胞球蛋白包被于微孔板固相载体上，实验时加入待测样本、标准品，样本中存在的抗淋巴细胞球蛋白可与固相包被抗原特异性结合；洗去未结合物质后，加入酶标记二抗与结合的一抗特异性反应，再次洗涤去除游离酶标抗体，加入底物显色液进行显色反应，最后加入终止液终止反应，通过酶标仪测定各孔吸光度值，吸光度值与样本中抗淋巴细胞球蛋白的含量呈正相关，依据标准曲线即可精准计算样本中目标抗体的浓度。
基本参数：
产品名称：人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒
英文名称：ALG Elisa Kit
货号：Y-E502
规格：48T/96T
灵敏度：最低可检测浓度 0.3ng/mL
检测范围：0.75ng/mL - 24ng/mL
反应时间：样本孵育 60min，酶结合物孵育 30min，底物显色 15min，总时长约 105min
保存条件：未拆封试剂盒 2~8℃避光保存；开封后板条密封 2~8℃，剩余试剂 2~8℃，有效期 6 个月
显色系统：TMB 单组分显色液，HRP 催化显色
检测波长：主波长 450nm，参比波长 630nm
标准曲线绘制：以标准品浓度为 X 轴，OD 值为 Y 轴，采用四参数 Logistic 拟合生成标准曲线，样本浓度由曲线方程换算
注意事项：洗涤步骤必须充分，避免非特异性结合；底物避光操作，终止液为稀硫酸，防止皮肤接触灼伤
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 30min，取出酶标板，设置空白孔、阴性对照孔、阳性对照孔、待测样本孔，每孔做好标记。
每孔直接加入稀释完成的待测样本、阴性对照液、阳性对照液各 50μL，空白孔不加任何液体。
所有检测孔加入酶结合工作液 50μL，轻轻震荡酶标板混匀，封板膜密封孔板。
37℃恒温孵育 60min，期间避免孔板晃动、阳光直射。
撕掉封板膜，弃去孔内液体，每孔加满洗涤液静置 30s 后甩干，重复洗板 5 次，最后一次拍干孔内残留液体。
每孔依次加入显色液 A 液 50μL、显色液 B 液 50μL，避光轻柔混匀，37℃避光显色 15min。
每孔快速加入终止液 50μL 终止反应，酶标仪设置 450nm 波长，15min 内读取各孔 OD 值，结合标准曲线计算样本浓度。
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