本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理,酶标板预先包被人UP特异性抗体,待测尿液样本中的尿蛋白与固相抗体特异性结合,随后加入辣根过氧化物酶标记抗体形成免疫复合物,洗涤去除非特异性结合成分后进行底物显色,终止后检测OD值,依据标准曲线定量测定样本中尿蛋白的含量。
产品参数:
产品名称 | 人尿蛋白(UP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3134 |
英文名称 | UP Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:5.2 mg/L
检测范围:15mg/L~900mg/L
反应时间:室温孵育 110min,酶结合物 54min,显色 20min,总 184min
保存条件:试剂盒 2-8℃,浓缩洗涤液室温储存
显色系统:OPD 底物显色,硫酸终止
检测波长:492nm
标准曲线绘制:5 个蛋白浓度梯度,最小二乘法拟合
注意事项:尿液样本需离心取上清,去除沉渣杂质后检测
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
样本预处理:尿液样本 3000r/min 离心 5min 取上清,按需稀释;梯度配制 UP 标准品。
板孔点样:各微孔加入标准品、待测尿液上清、空白对照液 100μL。
酶标记抗体共加:每孔加入酶标抗 UP 抗体 100μL,封板混匀。
孵育结合:37℃避光孵育 54min。
洗板除杂:弃净液体,洗液浸泡 40s 拍干,洗板 4 次。
避光显色:加入 TMB 显色液,显色 17min。
终止检测:终止液终止反应,450nm 测定吸光值,定量尿液 UP 含量。
关键字: 人尿蛋白;UP;ELISA试剂盒;
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