本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理,酶标板预先包被抗人葡萄糖6磷酸异构酶特异性单克隆抗体。检测时,样本内的葡萄糖6磷酸异构酶抗原与固相抗体特异性结合,孵育完成后洗涤去除未结合成分,加入HRP标记的检测抗体形成夹心免疫复合物,再次洗涤后加入TMB底物显色,底物在酶的催化下生成蓝色产物,加入终止液后转为黄色,吸光度值与样本中GPI含量正相关,依托标准曲线可精准定量待测样本中的指标浓度。
产品参数:
产品名称 | 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E998 |
英文名称 | GPI Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检测值 0.05U/L
检测范围:0.15U/L~19.2U/L
反应时间:37℃样本孵育 60min,酶结合物孵育 48min,避光显色 16min
保存条件:未开封 2-8℃;微孔板拆封后需装入自封袋加干燥剂密封冷藏
显色系统:可溶性单组分 TMB 显色试剂
检测波长:450nm 单波长检测
标准曲线绘制:四参数非线性拟合,剔除偏差过大标准孔后构建曲线
注意事项:血浆样本建议使用 EDTA 抗凝,肝素抗凝易抑制酶促反应导致结果偏低
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒组分室温平衡 28min,配制工作洗涤液;取出所需包被板条,做好实验标记。
梯度 GPI 标准品 50μL 加入标准孔,待测稀释样本 50μL 加入样本孔,空白孔不加试剂。
所有加样孔加入一步法酶结合抗体工作液 100μL,封板后轻微震荡混匀孔内液体。
37℃避光孵育 60min,严格把控孵育时长。
倒掉孔中液体,洗涤液加满每孔,浸泡 30s 后甩干,循环洗板 5 次,彻底去除未结合杂质。
每孔加入显色 A 液 50μL、显色 B 液 50μL,避光 37℃显色 14min。
加入终止液终止反应,酶标仪 450nm 读数,绘制标准曲线计算样本 GPI 含量。
关键字: 人葡萄糖6磷酸异构酶;GPI;ELISA试剂盒;
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