人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔包被抗人溶酶体相关膜蛋白2特异性抗体。样本中的HLAMP-2抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离组分后，加入辣根过氧化物酶标记二抗孵育结合，形成稳定免疫复合物，经显色反应、终止反应后检测吸光度，结合标准曲线完成样本中靶蛋白的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 0.076ng/mL

检测范围：0.24ng/mL～15.36ng/mL

反应时间：室温孵育 60min，37℃二抗 51min，显色 17min

保存条件：试剂盒竖直放置 2～8℃避光，禁止倒置导致试剂渗漏

显色系统：A、B 液 1:1 配比混合显色

检测波长：450nm+650nm 双波长校正

标准曲线绘制：最小二乘法线性回归构建曲线

注意事项：细胞上清样本需去除细胞沉淀，溶酶体破裂碎片会干扰孔内结合反应
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

全部试剂室温放置 30min，配制洗涤工作液；组装酶标板并标注各类孔位。

标准品孔上样倍比稀释 HLAMP-2 标准品 50μL，样本孔加入稀释待测样品 50μL，空白孔不加试剂。

每孔加入一步法酶结合一抗工作液 100μL，封板严实封口。

37℃避光孵育 72min，延长孵育提升大分子蛋白结合效果。

洗板 5 次，每次洗涤液浸泡 40s，反复洗涤去除非特异性结合杂质，拍干板条。

依次添加显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 18min。

加入终止液终止显色，450nm 检测吸光度，拟合曲线计算 HLAMP-2 浓度。