本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术原理，固相酶标板包被人MAP-2特异性单克隆抗体，加入标准品和待测样本后，样本内微管相关蛋白2与固相抗体特异性结合，洗板去除游离杂质，加入辣根过氧化物酶标记二抗形成免疫复合物，充分反应后洗去未结合抗体，加入底物显色，终止后检测吸光度，依据标准曲线精准测定样本中MAP-2的含量。
基本参数：
产品名称：人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒
英文名称：MAP-2 Elisa Kit
货号：Y-E201
规格：48T/96T
灵敏度：检出限 0.06ng/mL
检测范围：0.11～9.8ng/mL
反应时间：室温振荡孵育 82min，酶标二抗 54min，显色 17min
保存条件：未开封整套 2～8℃；开封后剩余板条密封加干燥剂
显色系统：单一瓶装即用 TMB 显色液
检测波长：450nm+650nm 双波长
标准曲线绘制：去除最高浓度漂移孔后进行四参数建模
注意事项：脑组织裂解样本需充分离心取上清，沉淀不可加入检测孔
实验前准备工作：
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释：
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。
待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：
试剂盒室温静置 30min，MAP-2 包被酶标板弃孔内保存液，洗涤缓冲液洗板 2 次，吸水纸拍干微孔。
区分空白、标准品、脑组织样本孔；标准品孔加入倍比稀释 MAP-2 标准品 50μL，样本孔加入裂解稀释上清 50μL，空白孔补稀释液。
每孔加入酶结合抗体 50μL，覆膜封板，37℃孵育 57min。
弃废液，洗板液加满每孔静置 30s 倒掉，洗板 6 次，彻底拍干微孔残留洗液。
依次添加显色 A、B 液各 50μL，避光 37℃显色 14min。
加入终止液 50μL 混匀终止底物显色。
酶标仪 450nm 检测 OD 值，标准曲线换算 MAP-2 蛋白浓度。
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