本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附检测原理,将纯化的人乳铁蛋白抗原包被于酶标板微孔。检测过程中,样本中的乳铁蛋白IgG抗体与固相抗原特异性结合,孵育洗涤后加入酶标记抗人IgG二抗,再次洗涤后进行底物显色,终止反应后测定吸光度,吸光度数值与样本中靶抗体含量成正比,通过标准曲线实现定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA试剂 | 货号 | Y-E518 |
英文名称 | LF/LTF Ab-IgG Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出限 0.045AU/mL
检测范围:0.13AU/mL~8.32AU/mL
反应时间:抗原结合孵育 49min,酶标抗人 IgG 孵育 45min,显色 15min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光密封,开封后 30 天内用完剩余试剂
显色系统:临用新配双组份 TMB 显色液
检测波长:仅 450nm 波长读取吸光度
标准曲线绘制:浓度取对数后线性回归绘制定量曲线
注意事项:乳汁样本需离心去除脂肪层,脂类包裹抗原会降低抗体结合效率
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂盒组分室温平衡 32min,配比稀释洗涤液;固定酶标板框架区分孔位类型。
标准品孔加入梯度稀释 LF 抗体 IgG 标准品 50μL,样本孔加入稀释待测样本 50μL,空白孔空置。
非空白孔加入一步法酶标二抗工作液 100μL,密封封板膜。
37℃避光孵育 66min,避光孵育避免底物提前氧化。
洗板 4 次,每次洗涤液浸泡 36s,甩干废液后吸水纸拍净残液。
每孔添加显色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 16min。
加入终止液终止反应,酶标仪 450nm 读数,计算乳铁蛋白 IgG 抗体滴度。
关键字: 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG;LF/LTF Ab-Ig;ELISA试剂盒;
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