本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板预固定SK特异性捕获抗体,样本中的人链激酶与抗体特异性结合,加入HRP标记的SK检测抗体构建夹心复合物,洗涤去除游离组分后进行底物显色,吸光度与SK浓度呈线性正相关,借助标准曲线实现SK的定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人链激酶(SK)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3001 |
英文名称 | SK Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤0.09IU/mL
检测范围:0.3IU/mL–20IU/mL
反应时间:37℃分步孵育总时长 140min
保存条件:2–8℃冷藏,酶标记物不可反复冻融
显色系统:单组份 TMB 显色
检测波长:450/630nm
标准曲线绘制:四参数回归法绘制标准曲线
注意事项:溶栓治疗后采血样本避免凝血因子降解影响结果
实验前准备工作:
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
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实验操作流程:
样本稀释:血浆样本按说明书比例稀释,充分吹打混匀;
微孔加样:酶标板各孔添加梯度标准品、待测样本 100μL;
同步免疫孵育:直接加入酶标记检测液,覆膜 37℃孵育 54min;
洗涤微孔:倒掉孔内液体,洗涤液浸泡 26s,拍干,洗板 4 次;
显色反应:加入 TMB 显色液避光 13min;
终止操作:加入终止液混匀板面液体;
浓度测算:酶标仪 450nm 测 OD 值,计算链激酶 SK 浓度。
关键字: 人链激酶;SK;ELISA试剂盒;
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