人淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，针对人Ly6a蛋白设计特异性包被抗体与酶标抗体，微孔板捕获样本中的淋巴细胞抗原6复合物基因座A蛋白，与酶标抗体结合形成免疫复合物，经显色、终止反应后，通过吸光度检测结合标准曲线，定量分析样本中Ly6a蛋白的含量。
产品参数：

‌灵敏度：LOD≤0.06ng/mL

检测范围：0.22ng/mL–13ng/mL

反应时间：37℃湿盒反应合计 135min

保存条件：试剂盒 2~8℃，浓缩洗涤液稀释后仅限当日使用

显色系统：TMB 单液显色

检测波长：450nm，参比 620nm

标准曲线绘制：对数坐标拟合标准曲线用于浓度换算

注意事项：所有试剂使用前室温平衡 20min，减少孔间差异
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

样本稀释：待测生物上清用配套稀释液稀释，涡旋震荡混匀；

微孔加样：各孔依次加入标准梯度液与待测样本，单孔 100μL；

同步孵育：直接加入酶标记试剂，封板 37℃孵育 59min；

洗板净化：洗涤液浸泡 30s，拍干，重复洗板 5 次；

显色孵育：加入显色底物避光 12min；

终止反应：添加终止液终止显色；

结果计算：酶标仪 450nm 测 OD 值，换算 Ly6a 蛋白浓度。