人磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板包被PLSCR1特异性单克隆抗体，样本中的人磷脂爬行酶1与固相抗体特异性结合，结合酶标检测抗体后形成稳定免疫夹心复合物，经显色反应及吸光度检测，结合标准曲线可精准定量样本中PLSCR1蛋白的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：LOD≤0.04ng/mL

检测范围：0.14ng/mL–7ng/mL

反应时间：分步加样孵育合计 155min

保存条件：试剂盒 2~8℃，微孔板条密封防潮冷藏

显色系统：改良 TMB 显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：6 梯度稀释标准品，线性回归生成曲线

注意事项：细胞膜蛋白提取上清避免脂质杂质干扰洗板效果
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

样本前处理：细胞膜裂解上清高速离心取澄清液体，稀释混匀；

微孔加样：酶标板各孔加入标准品、待测裂解样本 100μL；

同步免疫孵育：直接加入酶标记抗体，覆膜 37℃孵育 65min；

洗涤微孔：弃液后洗涤液浸泡 29s，拍干，洗板 4 次；

避光显色：加入显色 A、B 液反应 15min；

终止操作：加入终止液混匀板面；

结果分析：酶标仪测吸光度，标准曲线计算 PLSCR1 含量。